<div dir="ltr">Dear all,<div><br></div><div>In case folks find it useful, we recently described a simple, 3d-printed jig to assess grid hydrophilicity by measuring the contact angle of a droplet of buffer, as Kadir mentions. <br><br>A preprint including that protocol is here:</div><div>Application of monolayer graphene to cryo-electron microscopy grids for high-resolution structure determination<br>Andrew V. Grassetti, Mira B. May, Joseph H. Davis<br>bioRxiv 2023.07.28.550908; doi: <a href="https://urldefense.com/v3/__https://doi.org/10.1101/2023.07.28.550908__;!!Mih3wA!B5bcwFrpxRf-x1T_JvaAS-N_6UhHXBF8MstLq8p0R-GqPFrnd550vUHAPPD7RPuNtO8YxhZ_KZ3kPIn2FmM$" target="_blank">https://doi.org/10.1101/2023.07.28.550908</a><br></div><div><br></div><div>and the peer-reviewed manuscript here:</div><div>J. Vis. Exp.(201), e66023, doi:10.3791/66023 (2023).<br></div><div><br></div><div>There, you'll also find a practical protocol for making graphene grids following the method of Han et al. (PNAS 2020), and for rendering these grids more hydrophilic via UV/Ozone treatment.</div><div><br></div><div>Cheers,</div><div>Joey</div></div><br><div class="gmail_quote"><div dir="ltr" class="gmail_attr">On Fri, Dec 8, 2023 at 3:03 PM Ozcan, Kadir Ali <<a href="mailto:kozcan@purdue.edu" target="_blank">kozcan@purdue.edu</a>> wrote:<br></div><blockquote class="gmail_quote" style="margin:0px 0px 0px 0.8ex;border-left:1px solid rgb(204,204,204);padding-left:1ex">Hello Dario,<br>
<br>
It is natural for GO grids to be hydrophobic despite GO's hydrophilic functional group content. As you and others have suggested, a short glow discharge can render grids hydrophilic however may potentially damage the GO layer. A safer way to render grids hydrophilic is exposing them to ozone. Our lab uses a cheap ozone generator we purchased on Amazon, the product name is "Aqua-6, 120 mg/hour Water Ozone Generator" from the A2Z Ozone Store (no affiliation). Place your grids in a petri dish or other small container with the ozone output source close to the grids for 15-60 minutes. You can empirically determine the optimal time for your grids and assess hydrophilicity by adding water/buffer. In my experience 30 minutes is typically long enough. Additionally, adding a UV light source directed towards the grids in tandem with ozone may improve hydrophilicity. Let me know if you have any questions.<br>
<br>
Best,<br>
<br>
Kadir Ozcan<br>
PhD Candidate at Purdue University<br>
Wen Jiang Lab<br>
<br>
------------------------------<br>
<br>
Message: 4<br>
Date: Thu, 7 Dec 2023 17:48:21 +0100<br>
From: Dario <<a href="mailto:dariobrack@googlemail.com" target="_blank">dariobrack@googlemail.com</a>><br>
To: <a href="mailto:3dem@ncmir.ucsd.edu" target="_blank">3dem@ncmir.ucsd.edu</a><br>
Subject: [3dem] Graphene Oxide grids hydrophobic<br>
Message-ID:<br>
        <CAHOoyBO3zhtgTyaeCtgAmVY7ykCqE2EzSMNe-0Kw+CGbH9i=<a href="mailto:oA@mail.gmail.com" target="_blank">oA@mail.gmail.com</a>><br>
Content-Type: text/plain; charset="utf-8"<br>
<br>
Dear all,<br>
<br>
I have ordered commercial GO grids (QF 300 Cu R2/2 GO) and expected them to be hydrophilic out of the box due to the GO layer.<br>
However, the grid was not covered by the 3ul sample drop and appeared quite hydrophobic. How do you prepare the GO grids for plunging?<br>
<br>
I plasma cleaned them with air for 8sec, after that they were very hydrophilic, but I am afraid I might have destroyed the GO layer.<br>
<br>
Best<br>
<br>
Dario<br>
<br>
<br>
<br>
<br>
_______________________________<br>
<br>
Dr. Dario Saczko-Brack<br>
Postdoc<br>
<br>
Ludwig-Maximilians-Universit?t M?nchen<br>
Department of Cellular Physiology<br>
Biomedical Center Munich - BMC<br>
Gro?haderner Str. 9<br>
D-82152 Planegg-Martinsried<br>
<br>
Prof. Dr. Claudia Veigel<br>
<br>
Room: N.C 01.033<br>
Phone: +49 (0) 89 2180 71588<br>
Fax: +49 (0) 89 2180 71732<br>
Email: <a href="mailto:Dario.Saczko-Brack@med.lmu.de" target="_blank">Dario.Saczko-Brack@med.lmu.de</a><br>
-------------- next part --------------<br>
An HTML attachment was scrubbed...<br>
URL: <<a href="http://mail.ncmir.ucsd.edu/pipermail/3dem/attachments/20231207/f60ab2a5/attachment-0001.html" rel="noreferrer" target="_blank">http://mail.ncmir.ucsd.edu/pipermail/3dem/attachments/20231207/f60ab2a5/attachment-0001.html</a>><br>
<br>
------------------------------<br>
_______________________________________________<br>
3dem mailing list<br>
<a href="mailto:3dem@ncmir.ucsd.edu" target="_blank">3dem@ncmir.ucsd.edu</a><br>
<a href="https://mail.ncmir.ucsd.edu/mailman/listinfo/3dem" rel="noreferrer" target="_blank">https://mail.ncmir.ucsd.edu/mailman/listinfo/3dem</a><br>
</blockquote></div><br clear="all"><div><br></div><span class="gmail_signature_prefix">-- </span><br><div dir="ltr" class="gmail_signature"><div dir="ltr"><div><div dir="ltr"><div><div dir="ltr"><div style="font-size:small">~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~<br>Joseph H. Davis</div><div style="font-size:small">Whitehead Assistant Professor of Biology</div><div style="font-size:small">Associate Member, Broad Institute</div><div style="font-size:small">Massachusetts Institute of Technology</div><div style="font-size:small">77 Massachusetts Ave.</div><div style="font-size:small">68-671A</div><div style="font-size:small">Cambridge, MA 02139</div><div style="font-size:small">617.258.6154</div><div style="font-size:small"><a href="https://urldefense.com/v3/__http://www.jhdavislab.org__;!!Mih3wA!B5bcwFrpxRf-x1T_JvaAS-N_6UhHXBF8MstLq8p0R-GqPFrnd550vUHAPPD7RPuNtO8YxhZ_KZ3k_AaIVjo$" target="_blank">www.jhdavislab.org</a></div><div style="font-size:small">~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~<br></div></div></div></div></div></div></div>