<html>
<head>
<meta http-equiv="Content-Type" content="text/html; charset=iso-8859-1">
<style type="text/css" style="display:none;"> P {margin-top:0;margin-bottom:0;} </style>
</head>
<body dir="ltr">
<div class="elementToProof"><span style="font-family: Calibri, Helvetica, sans-serif; font-size: 12pt; color: rgb(0, 0, 0); background-color: rgb(255, 255, 255);">Hi,</span></div>
<div class="elementToProof"><span style="font-family: Calibri, Helvetica, sans-serif; font-size: 12pt; color: rgb(0, 0, 0); background-color: rgb(255, 255, 255);"><br>
</span></div>
<div class="elementToProof"><span style="font-family: Calibri, Helvetica, sans-serif; font-size: 12pt; color: rgb(0, 0, 0); background-color: rgb(255, 255, 255);">I have a stupid question about the MRC files output by our Falcon 3 camera.  I just acquired a
 set of movies in counting mode where the total dose should be on the order of 25 electrons/ A^2, spread over 22 frames.  My pixel size is just under 1 A, so my images should have on the order of 20 - 25 electrons per pixel.  At least the average over all the
 pixels after summing or motion correction should be close to that...</span></div>
<div class="elementToProof"><span style="font-family: Calibri, Helvetica, sans-serif; font-size: 12pt; color: rgb(0, 0, 0); background-color: rgb(255, 255, 255);"><br>
</span></div>
<div class="elementToProof"><span style="font-family: Calibri, Helvetica, sans-serif; font-size: 12pt; color: rgb(0, 0, 0); background-color: rgb(255, 255, 255);">When I examine the MRC files output by EPU, I find the following min/max/mean for an example acquisition:</span></div>
<div class="elementToProof">
<ol>
<li style="font-size: 12pt; font-family: Calibri, Helvetica, sans-serif; color: rgb(0, 0, 0);">
<span style="font-family: Calibri, Helvetica, sans-serif; font-size: 12pt; color: rgb(0, 0, 0); background-color: rgb(255, 255, 255);">file with fractions (22 frames): min = 0, max = -1, mean = -2 (obviously bogus values)</span></li><li style="font-size: 12pt; font-family: Calibri, Helvetica, sans-serif; color: rgb(0, 0, 0);">
<span style="font-family: Calibri, Helvetica, sans-serif; font-size: 12pt; color: rgb(0, 0, 0); background-color: rgb(255, 255, 255);">fractions after recalculating min/mix/mean:  min = -23, max = 549, mean = 108.27</span></li><li style="font-size: 12pt; font-family: Calibri, Helvetica, sans-serif; color: rgb(0, 0, 0);">
<span style="font-family: Calibri, Helvetica, sans-serif; font-size: 12pt; color: rgb(0, 0, 0); background-color: rgb(255, 255, 255);">summed image (non-motion corrected single frame output by EPU): min = 1239, max = 3809, mean = 2382<br>
</span></li></ol>
</div>
<div class="elementToProof" style="font-family: Calibri, Helvetica, sans-serif; font-size: 12pt; color: rgb(0, 0, 0); background-color: rgb(255, 255, 255);">
My stupid question:  How do these numbers relate to what should be the counted number of electrons that hit the specimen? 
<br>
</div>
<div class="elementToProof" style="font-family: Calibri, Helvetica, sans-serif; font-size: 12pt; color: rgb(0, 0, 0); background-color: rgb(255, 255, 255);">
<br>
</div>
<div class="elementToProof" style="font-family: Calibri, Helvetica, sans-serif; font-size: 12pt; color: rgb(0, 0, 0); background-color: rgb(255, 255, 255);">
I suspect that I am seeing some stupid effect of an "average counts per electron" in these images, but I had previously (and I suppose foolishly) assumed that in counted mode images, one count would mean one electron...<br>
</div>
<div class="elementToProof">
<div style="font-family: Calibri, Helvetica, sans-serif; font-size: 12pt; color: rgb(0, 0, 0);">
<br>
</div>
<div style="font-family: Calibri, Helvetica, sans-serif; font-size: 12pt; color: rgb(0, 0, 0);">
Thanks for any input you can offer, and Happy New Year.<br>
</div>
<div style="font-family: Calibri, Helvetica, sans-serif; font-size: 12pt; color: rgb(0, 0, 0);">
<br>
</div>
<div id="Signature">
<div>
<div name="divtagdefaultwrapper" style="font-family:Calibri,Arial,Helvetica,sans-serif; font-size:; margin:0">
<div name="divtagdefaultwrapper" style="font-family:Calibri,Arial,Helvetica,sans-serif; font-size:; margin:0">
-- </div>
<div name="divtagdefaultwrapper" style="font-family:Calibri,Arial,Helvetica,sans-serif; font-size:; margin:0">
    politics is more difficult than physics.</div>
<div name="divtagdefaultwrapper" style="font-family:Calibri,Arial,Helvetica,sans-serif; font-size:; margin:0">
                                             A. Einstein</div>
<div name="divtagdefaultwrapper" style="font-family:Calibri,Arial,Helvetica,sans-serif; font-size:; margin:0">
<br>
<div name="divtagdefaultwrapper" style="font-family:Calibri,Arial,Helvetica,sans-serif; font-size:; margin:0">
            David Gene Morgan<br>
        Electron Microscopy Center<br>
             047E Simon Hall<br>
             IU Bloomington<br>
          812 856 1457 (office)<br>
          812 856 3221 (3200)<br>
      <a href="https://urldefense.com/v3/__http://iubemcenter.indiana.edu__;!!Mih3wA!E-FcoZUZdcr3llQ_tQ7nra_aC45SHHOofl5vsdk4RilKOYWBacUzdW1K8BzGLp3U7LbXIfTjwt3E1eA8hKRTl-Y$">http://iubemcenter.indiana.edu</a></div>
</div>
</div>
</div>
</div>
</div>
</body>
</html>