<div dir="ltr">Hi,<div><br><div>What is the lipid composition of the nanodiscs? If you are using a single lipid (such as PC only) the chance of incorporation of protein is low sometimes and may cause protein dissociation. if you use a mixture of lipids (such as PC/PS or PC/PE/PS) it may stabilize the protein in nanodiscs more than a single lipid nanodiscs. </div></div></div><br><div class="gmail_quote"><div dir="ltr" class="gmail_attr">On Fri, Oct 15, 2021 at 8:13 AM Dykstra, Holly <<a href="mailto:Holly.Dykstra@vai.org">Holly.Dykstra@vai.org</a>> wrote:<br></div><blockquote class="gmail_quote" style="margin:0px 0px 0px 0.8ex;border-left:1px solid rgb(204,204,204);padding-left:1ex">





<div lang="EN-US" style="overflow-wrap: break-word;">
<div class="gmail-m_-1510756794244366360WordSection1">
<p class="MsoNormal">Hello all,<u></u><u></u></p>
<p class="MsoNormal">I am working on a single-TM membrane protein in nanodisc. Upon freezing grids, I am observing protein dissociation from the nanodisc. A small percentage of the total particle population is intact protein-nanodisc complex but most of the
 particles have dissociated. I believe this is happening at the point of freezing as negative stain shows the intact protein-nanodisc complex. Has anyone else experienced this problem or does anyone have any suggestions or advice?<u></u><u></u></p>
<p class="MsoNormal">Thanks!<u></u><u></u></p>
<p class="MsoNormal">-Holly<u></u><u></u></p>
</div>
</div>

_______________________________________________<br>
3dem mailing list<br>
<a href="mailto:3dem@ncmir.ucsd.edu" target="_blank">3dem@ncmir.ucsd.edu</a><br>
<a href="https://mail.ncmir.ucsd.edu/mailman/listinfo/3dem" rel="noreferrer" target="_blank">https://mail.ncmir.ucsd.edu/mailman/listinfo/3dem</a><br>
</blockquote></div><br clear="all"><div><br></div>-- <br><div dir="ltr" class="gmail_signature"><div dir="ltr"><div dir="ltr"><div dir="ltr"><div dir="ltr"><div dir="ltr"><div dir="ltr"><div dir="ltr"><div dir="ltr"><div dir="ltr"><div dir="ltr">Regards,</div><div dir="ltr"><br></div><div dir="ltr"><b>Amarshi Mukherjee, M.Sc., Ph.D.</b></div><div dir="ltr">Research Associate</div><div dir="ltr">Department of Neuroscience</div><div dir="ltr">Wisconsin Institute for Medical Research (WIMR)</div><div dir="ltr">1111 Highland Avenue, Madison, WI 53705</div><div dir="ltr">Mobile: 443-683-6757</div><div dir="ltr">Email: <a href="mailto:amukherjee29@wisc.edu" target="_blank">amukherjee29@wisc.edu</a>, <a href="mailto:amarshimukherjee@gmail.com" target="_blank">amarshimukherjee@gmail.com</a></div></div></div></div></div></div></div></div></div></div></div>