<html>
<head>
<meta http-equiv="Content-Type" content="text/html; charset=iso-8859-1">
</head>
<body style="word-wrap: break-word; -webkit-nbsp-mode: space; line-break: after-white-space;" class="">
<style type="text/css" style="display:none;"><!-- P {margin-top:0;margin-bottom:0;} --></style>
<div id="divtagdefaultwrapper" style="font-size:12pt;color:#000000;font-family:Calibri,Helvetica,sans-serif;" dir="ltr">
<p>Dear Linda,</p>
<p><br>
</p>
<p>When working with cells (eukaryote or prokaryote) that need fixation because of safety issues, I usually fix them in 4% PFA.</p>
<p>This protocol never gave broken/damaged cells.</p>
<p><br>
</p>
<p>On what type of sample do you want to use chemical fixation ?</p>
<p><br>
</p>
<p>Kind regards,</p>
<p>Sylvain</p>
<div id="Signature">
<div id="divtagdefaultwrapper" dir="ltr" style="font-size: 12pt; color: rgb(0, 0, 0); font-family: Calibri, Arial, Helvetica, sans-serif, EmojiFont, "Apple Color Emoji", "Segoe UI Emoji", NotoColorEmoji, "Segoe UI Symbol", "Android Emoji", EmojiSymbols;">
<div class="BodyFragment"><font size="2"><span style="font-size:10pt">
<div class="PlainText">----------<br>
Sylvain TREPOUT, PhD, HDR</div>
<div class="PlainText"><span style="font-family:Calibri,Arial,Helvetica,sans-serif,EmojiFont,"Apple Color Emoji","Segoe UI Emoji",NotoColorEmoji,"Segoe UI Symbol","Android Emoji",EmojiSymbols; font-size:13.3333px"><span style="font-family:Calibri,Arial,Helvetica,sans-serif; font-size:13.3333px">IR2 Inserm</span></span></div>
<div class="PlainText"><span style="font-family:Calibri,Arial,Helvetica,sans-serif,EmojiFont,"Apple Color Emoji","Segoe UI Emoji",NotoColorEmoji,"Segoe UI Symbol","Android Emoji",EmojiSymbols; font-size:13.3333px">Plateforme de Microscopie Electronique</span><br>
INSERM US43 / CNRS UMS2016
<div>Institut Curie Centre De Recherche<br>
Centre Universitaire, Bât. 101B-110-111-112<br>
Rue Henri Becquerel<br>
CS 90030<br>
91401 ORSAY Cedex, FRANCE</div>
Phone : +33 1 69 86 30 81<br>
Fax : +33 1 69 07 53 27</div>
</span></font></div>
</div>
</div>
</div>
<hr style="display:inline-block;width:98%" tabindex="-1">
<div id="divRplyFwdMsg" dir="ltr"><font face="Calibri, sans-serif" style="font-size:11pt" color="#000000"><b>De :</b> 3dem <3dem-bounces@ncmir.ucsd.edu> de la part de Linda Sandblad <linda.sandblad@umu.se><br>
<b>Envoyé :</b> lundi 18 janvier 2021 12:18:42<br>
<b>À :</b> 3dem@ncmir.ucsd.edu<br>
<b>Objet :</b> [3dem] Chemical fixation before plunge freezing or HPF</font>
<div> </div>
</div>
<div>Dear best colleagues!
<div class=""><br class="">
</div>
<div class="">
<div class="">What chemical fixation protocols works for your projects before plunge freezing (or HPF) or what typs of chemical fixation was not good (destroyed more than it helped) prior to cryo-EM sample preparation?</div>
<div class=""><br class="">
</div>
<div class="">Im interested in your experiences, also happy if you have adressed this question in a article and would like to share the link with me.</div>
<div class=""><br class="">
</div>
<div class="">For cryo-EM we prefer to work as close to native as possible, avoiding chemical fixations, but sometimes a fixation is needed to test or move on with tricky projects. For examples, when bacteria cultures are tricky and samples need to be stored,
 or when bio safety restricts work in the EM labs (lab specific and different).</div>
<div class=""><br class="">
</div>
<div class="">Best regards, Linda</div>
<div class=""><br class="">
</div>
<div class="">
<div class="">
<div dir="auto" style="caret-color: rgb(0, 0, 0); color: rgb(0, 0, 0); letter-spacing: normal; text-align: start; text-indent: 0px; text-transform: none; white-space: normal; word-spacing: 0px; -webkit-text-stroke-width: 0px; text-decoration: none; word-wrap: break-word; -webkit-nbsp-mode: space; line-break: after-white-space;" class="">
<div dir="auto" style="caret-color: rgb(0, 0, 0); color: rgb(0, 0, 0); letter-spacing: normal; text-align: start; text-indent: 0px; text-transform: none; white-space: normal; word-spacing: 0px; -webkit-text-stroke-width: 0px; text-decoration: none; word-wrap: break-word; -webkit-nbsp-mode: space; line-break: after-white-space;" class="">
<div dir="auto" style="caret-color: rgb(0, 0, 0); color: rgb(0, 0, 0); letter-spacing: normal; text-align: start; text-indent: 0px; text-transform: none; white-space: normal; word-spacing: 0px; -webkit-text-stroke-width: 0px; text-decoration: none; word-wrap: break-word; -webkit-nbsp-mode: space; line-break: after-white-space;" class="">
<div dir="auto" style="word-wrap: break-word; -webkit-nbsp-mode: space; line-break: after-white-space;" class="">
<div style="caret-color: rgb(0, 0, 0); color: rgb(0, 0, 0); font-family: Helvetica; font-size: 12px; font-style: normal; font-variant-caps: normal; font-weight: normal; letter-spacing: normal; text-align: start; text-indent: 0px; text-transform: none; white-space: normal; word-spacing: 0px; -webkit-text-stroke-width: 0px; text-decoration: none;">
Linda Sandblad, researcher and facility director<br class="">
Umeå Core Facility for Electron Microscopy, SciLifeLab Cryo-EM, NMI<br class="">
Department of Chemistry, Umeå University, Sweden<br class="">
Tel: +46 709324936</div>
</div>
</div>
</div>
</div>
</div>
<br class="">
</div>
</div>
</div>
</body>
</html>