<html>
<head>
<meta http-equiv="Content-Type" content="text/html; charset=us-ascii">
<style type="text/css" style="display:none;"> P {margin-top:0;margin-bottom:0;} </style>
</head>
<body dir="ltr">
<div style="font-family: Calibri, Arial, Helvetica, sans-serif; font-size: 12pt; color: rgb(0, 0, 0);">
<div style="color:black; font-size:12pt; font-family:Calibri,Arial,Helvetica,sans-serif">
I got a protein complex structure including 26 subunits and molecular weight 1MDa  with overall resolution at 4.0A, after local resolution calculation, some parts even are close to 3.5A, but one part goes to 15A, I tried to use multibody refinement in the Relion, 
 I only can give two bodies (due computer limit). After multibody refinement, resolution can improve to 6A, I tried focus refinement, it is not working, I wonder what difference between multibody refinement  ( two bodies ) and focus refinement?</div>
<div style="color:black; font-size:12pt; font-family:Calibri,Arial,Helvetica,sans-serif">
Do you have a detail tutorial for focus refinement? </div>
<div style="color:black; font-size:12pt; font-family:Calibri,Arial,Helvetica,sans-serif">
For focus refinement, after i did multibody refinement, I did particle subtraction, then do 3D auto-refinement with subtraction particles, the command like:</div>
<div style="color:black; font-size:12pt; font-family:Calibri,Arial,Helvetica,sans-serif">
`which relion_refine_mpi` --o Refine3D/job084/run --auto_refine --split_random_halves --i Subtract/job068/subtracted.star --ref MultiBody/job056/run_body001.mrc --ini_high 15 --dont_combine_weights_via_disc --no_parallel_disc_io --pool 10 --pad 1  --skip_gridding
  --ctf --ctf_corrected_ref --particle_diameter 200 --flatten_solvent --zero_mask --solvent_mask MultiBody/job056/run_body001_mask.mrc --solvent_correct_fsc  --oversampling 1 --healpix_order 2 --auto_local_healpix_order 4 --offset_range 5 --offset_step 2 --sym
 C1 --low_resol_join_halves 40 --norm --scale  --j 2 --gpu ""  --pipeline_control Refine3D/job084/</div>
<div style="color:black; font-size:12pt; font-family:Calibri,Arial,Helvetica,sans-serif">
<span>The focus refinement result is worse than multibody refinement.</span></div>
<div style="color:black; font-size:12pt; font-family:Calibri,Arial,Helvetica,sans-serif">
<span>Any input?</span></div>
<div style="color:black; font-size:12pt; font-family:Calibri,Arial,Helvetica,sans-serif">
<span><br>
</span></div>
<div style="color:black; font-size:12pt; font-family:Calibri,Arial,Helvetica,sans-serif">
<span>Haiyan Zhao<br>
</span></div>
<br>
</div>
<div id="appendonsend"></div>
<hr style="display:inline-block;width:98%" tabindex="-1">
<div id="divRplyFwdMsg" dir="ltr"><font face="Calibri, sans-serif" style="font-size:11pt" color="#000000"><b>From:</b> 3dem <3dem-bounces@ncmir.ucsd.edu> on behalf of 3dem-request@ncmir.ucsd.edu <3dem-request@ncmir.ucsd.edu><br>
<b>Sent:</b> Saturday, July 11, 2020 1:00 PM<br>
<b>To:</b> 3dem@ncmir.ucsd.edu <3dem@ncmir.ucsd.edu><br>
<b>Subject:</b> 3dem Digest, Vol 155, Issue 19</font>
<div> </div>
</div>
<div class="BodyFragment"><font size="2"><span style="font-size:11pt;">
<div class="PlainText">Send 3dem mailing list submissions to<br>
        3dem@ncmir.ucsd.edu<br>
<br>
To subscribe or unsubscribe via the World Wide Web, visit<br>
        <a href="https://mail.ncmir.ucsd.edu/mailman/listinfo/3dem">https://mail.ncmir.ucsd.edu/mailman/listinfo/3dem</a><br>
or, via email, send a message with subject or body 'help' to<br>
        3dem-request@ncmir.ucsd.edu<br>
<br>
You can reach the person managing the list at<br>
        3dem-owner@ncmir.ucsd.edu<br>
<br>
When replying, please edit your Subject line so it is more specific<br>
than "Re: Contents of 3dem digest..."<br>
<br>
<br>
Today's Topics:<br>
<br>
   1. Re: Tools for Sample Prep & Loading (Jean-Philippe Demers, Mr)<br>
<br>
<br>
----------------------------------------------------------------------<br>
<br>
Message: 1<br>
Date: Sat, 11 Jul 2020 08:26:58 +0000<br>
From: "Jean-Philippe Demers, Mr" <jean-philippe.demers@mail.mcgill.ca><br>
To: Michael Godfrin <mgodfrin@nanosoftmaterials.com>,<br>
        "3dem@ncmir.ucsd.edu" <3dem@ncmir.ucsd.edu><br>
Subject: Re: [3dem] Tools for Sample Prep & Loading<br>
Message-ID:<br>
        <YQBPR0101MB0785746EC721C773454FDD78EB620@YQBPR0101MB0785.CANPRD01.PROD.OUTLOOK.COM><br>
        <br>
Content-Type: text/plain; charset="utf-8"<br>
<br>
________________________________<br>
From: 3dem <3dem-bounces@ncmir.ucsd.edu> on behalf of Michael Godfrin <mgodfrin@nanosoftmaterials.com><br>
Sent: Friday, July 10, 2020 5:16:07 AM<br>
To: 3dem@ncmir.ucsd.edu <3dem@ncmir.ucsd.edu><br>
Subject: [3dem] Tools for Sample Prep & Loading<br>
<br>
Hello Everyone,<br>
<br>
We are now offering the Autogrid Tweezers<<a href="https://urldefense.com/v3/__https://www.nanosoftmaterials.com/autogrid-tweezer__;!!Mih3wA!WQP7K2_-M6BGn68iB-5ASXdMjh6jdrFdMs2AE50loTgYcz9-lwoh-0coGkNfYb_gmQ$">https://urldefense.com/v3/__https://www.nanosoftmaterials.com/autogrid-tweezer__;!!Mih3wA!WQP7K2_-M6BGn68iB-5ASXdMjh6jdrFdMs2AE50loTgYcz9-lwoh-0coGkNfYb_gmQ$</a>>
 that are used to handle autogrids/cartridges and load them into the autoloader cassette.  Our version performs the same as the Thermo Fisher Scientific version (same critical geometries), while we offer them at a much lower price, so they are a great option
 for replacement of damaged Autogrid Tweezers or to build up a rotation of them for the workflow.<br>
<br>
We are also offering the metal components<<a href="https://urldefense.com/v3/__https://www.nanosoftmaterials.com/vitrobotdewarparts__;!!Mih3wA!WQP7K2_-M6BGn68iB-5ASXdMjh6jdrFdMs2AE50loTgYcz9-lwoh-0coGkNX7tbQuQ$">https://urldefense.com/v3/__https://www.nanosoftmaterials.com/vitrobotdewarparts__;!!Mih3wA!WQP7K2_-M6BGn68iB-5ASXdMjh6jdrFdMs2AE50loTgYcz9-lwoh-0coGkNX7tbQuQ$</a>>
 of the Vitrobot dewar.  Each of the metal parts performs equally to the Thermo Fisher version, and are offered at a lower price (we have found even comparable to university machine shop pricing) so can replace lost or damaged parts or also be used for custom
 plunge systems.<br>
<br>
Have a nice weekend!<br>
Mike<br>
<br>
<br>
Michael Godfrin, PhD<br>
President<br>
<br>
[X]<br>
1372 Main St.<br>
Coventry, RI 02816<br>
Cell: (401) 829-5527<br>
<a href="https://urldefense.com/v3/__http://www.nanosoftmaterials.com__;!!Mih3wA!UbSXMSqzA9FXJvGs8L1OHcN7gyTrob1oZYyju_81EE2WUUONyHakHQEDppF3p0hHNw$">https://urldefense.com/v3/__http://www.nanosoftmaterials.com__;!!Mih3wA!UbSXMSqzA9FXJvGs8L1OHcN7gyTrob1oZYyju_81EE2WUUONyHakHQEDppF3p0hHNw$</a>
 <<a href="https://urldefense.com/v3/__http://www.nanosoftmaterials.com__;!!Mih3wA!WQP7K2_-M6BGn68iB-5ASXdMjh6jdrFdMs2AE50loTgYcz9-lwoh-0coGkPVjy6e8A$">https://urldefense.com/v3/__http://www.nanosoftmaterials.com__;!!Mih3wA!WQP7K2_-M6BGn68iB-5ASXdMjh6jdrFdMs2AE50loTgYcz9-lwoh-0coGkPVjy6e8A$</a>><br>
<br>
The information in this email may be confidential. It is only for the review of the sender and intended recipient. If you are not the intended recipient, any review, dissemination, distribution or duplication of this communication is strictly prohibited. If
 you are not the intended recipient, please inform the sender by email and destroy all copies of the original message.<br>
[X]?<br>
-------------- next part --------------<br>
An HTML attachment was scrubbed...<br>
URL: <<a href="http://mail.ncmir.ucsd.edu/pipermail/3dem/attachments/20200711/e12591e7/attachment-0001.html">http://mail.ncmir.ucsd.edu/pipermail/3dem/attachments/20200711/e12591e7/attachment-0001.html</a>><br>
<br>
------------------------------<br>
<br>
Subject: Digest Footer<br>
<br>
_______________________________________________<br>
3dem mailing list<br>
3dem@ncmir.ucsd.edu<br>
<a href="https://mail.ncmir.ucsd.edu/mailman/listinfo/3dem">https://mail.ncmir.ucsd.edu/mailman/listinfo/3dem</a><br>
<br>
<br>
------------------------------<br>
<br>
End of 3dem Digest, Vol 155, Issue 19<br>
*************************************<br>
</div>
</span></font></div>
</body>
</html>