<html>
<head>
<meta http-equiv="Content-Type" content="text/html; charset=iso-8859-1">
<style type="text/css" style="display:none"><!-- p { margin-top: 0px; margin-bottom: 0px; }--></style>
</head>
<body dir="ltr" style="font-size:12pt;color:#000000;background-color:#FFFFFF;font-family:Calibri,Arial,Helvetica,sans-serif;">
<p><span style="font-size:12pt">Hello,</span></p>
<div dir="ltr" style="font-size:12pt; color:#000000; background-color:#FFFFFF; font-family:Calibri,Arial,Helvetica,sans-serif">
<div>
<p><br>
</p>
<p>I hope all is safe. If you would please advise on the following:</p>
<p> <br>
</p>
<p>I made auto-refinement for a structure u<span style="font-family:Calibri,Arial,Helvetica,sans-serif; font-size:16px; background-color:rgb(255,255,255)">sing auto-sampling settings: I</span><span style="font-family:Calibri,Arial,Helvetica,sans-serif; font-size:16px; background-color:rgb(255,255,255)">nitial
 angular sampling</span><span style="font-family:Calibri,Arial,Helvetica,sans-serif; font-size:16px; background-color:rgb(255,255,255)"> 3.</span><span style="font-family:Calibri,Arial,Helvetica,sans-serif; font-size:16px; background-color:rgb(255,255,255)">7,
 local searching from auto-sampling 1.8. T</span>he output after convergence<span style="font-family:Calibri,Arial,Helvetica,sans-serif; font-size:16px; background-color:rgb(255,255,255)"> was "Final resolution (without masking) is: 3.26154</span>)". When I
 generate a mask using binarisation threshold from 0.001 to 0.005, where 0.005 gave warning, the FSC curve has a prominent peak in the FSC plot. I tried changing these parameters and tried the output from other refinement job with bigger box but all give this
 peak.<br>
</p>
<p><br>
</p>
<p>my questions<br>
</p>
<p>1- What caused and how to get rid of this peak?<br>
</p>
<p>2- If this peak problem could not be fixed, can I use proceed with such post-process.star file for ctf refinement and polishing?</p>
<p><br>
</p>
<p>Thank you very much for your help and time. <br>
</p>
<p><br>
</p>
<p><img name="null" title="pastedImage.png" src="cid:856f3e94-8d33-4343-b90c-0da81494cd59"><br>
</p>
<p><br>
</p>
<p>Last iteration before conversion: <br>
</p>
<p><br>
</p>
<div> CurrentResolution= 3.93402 Angstroms, which requires orientationSampling of at least 2.04545 degrees for a particle of diameter 220 Angstroms</div>
<div> Oversampling= 0 NrHiddenVariableSamplingPoints= 1305</div>
<div> OrientationalSampling= 0.46875 NrOrientations= 145</div>
<div> TranslationalSampling= 0.4605 NrTranslations= 9</div>
<div>=============================<br>
</div>
<div> Oversampling= 1 NrHiddenVariableSamplingPoints= 41760</div>
<div> OrientationalSampling= 0.234375 NrOrientations= 1160</div>
<div> TranslationalSampling= 0.23025 NrTranslations= 36<br>
<span style="font-size:12pt">E</span><span style="font-size:12pt">xpectation iteration 25</span><br>
</div>
<p><img name="null" title="pastedImage.png" src="cid:57a88797-0fb0-4e26-8cc9-aca291667ea6"><br>
</p>
</div>
</div>
</body>
</html>