<div dir="ltr">I agree with Stefan that they look like Gold fiducials (5nm or 10nm).  In addition to tweezers, if you are using a plunger such as a Vitrobot, it is also possible that the contaminating particles are on the pads where you place the rings of blotting paper.<div><br></div><div>Best,</div><div>Ben</div></div><div class="gmail_extra"><br><div class="gmail_quote">On Sat, Sep 30, 2017 at 12:20 AM, Stefan Bohn <span dir="ltr"><<a href="mailto:bohn.stefan.acc@gmail.com" target="_blank">bohn.stefan.acc@gmail.com</a>></span> wrote:<br><blockquote class="gmail_quote" style="margin:0 0 0 .8ex;border-left:1px #ccc solid;padding-left:1ex"><div dir="ltr">Hello Sabrina,<div><br></div><div>these particles look remarkably similar to nanogold particles I used before. These particles also preferred proteins (they loved the 26S) or showed clusters similar to the ones on the lower right image. They come in sizes from 2 to >5nm (can't see a scale-bar, but it seems your contamination is of similar size). </div><div><br></div><div>Is anyone using fiudical markers of any sort in your lab? One source of contamination would be the tweezers that hold the grid during plunging. In case those tweezers are shared among several 'plungers' and not readily cleaned after use of the markers, they could appear on the next grid being plunged.</div><div><br></div><div>Hope that helps,</div><div>Stefan.</div><div class="gmail_extra"><br><div class="gmail_quote"><div><div class="h5">On Fri, Sep 29, 2017 at 1:52 PM, Sabrina Pospich <span dir="ltr"><<a href="mailto:Sabrina.Pospich@mpi-dortmund.mpg.de" target="_blank">Sabrina.Pospich@mpi-dortmund.<wbr>mpg.de</a>></span> wrote:<br></div></div><blockquote class="gmail_quote" style="margin:0 0 0 .8ex;border-left:1px #ccc solid;padding-left:1ex"><div><div class="h5">



<div style="word-wrap:break-word">
<div>Dear EM community,</div>
<div><br>
</div>
<div>we are currently struggling with an electron dense contamination on our cryo-EM grids (see images below - left panel volta phase plate images with different phase shift - right panel standard TEM images at different magnifications).</div>
<div>The dots seem to appear almost randomly and like to stick to protein. We furthermore see them independently of the glow discharger (GloCube or an older device) and plunger (Cp3 or Vitrobot) we use and also for both C-flat and Quantifoils grids.</div>
<div>Has anyone seen those black dots before? We appreciate any hint.</div>
<div><br>
</div>
<div>Cheers,</div>
<div>Sabrina Pospich</div>
<div>(Representative for the Raunser lab, MPI Dortmund)</div>
<div><br>
</div>
<div><img id="m_-8704378365130005945m_-130911311294322303839D8F63D-ED7D-49C3-8DBB-9C068CF3AADB" width="748" height="386" src="cid:115172A7-0078-461B-88F7-50ABF840BA2F"></div>
</div>

<br></div></div>______________________________<wbr>_________________<br>
3dem mailing list<br>
<a href="mailto:3dem@ncmir.ucsd.edu" target="_blank">3dem@ncmir.ucsd.edu</a><br>
<a href="https://mail.ncmir.ucsd.edu/mailman/listinfo/3dem" rel="noreferrer" target="_blank">https://mail.ncmir.ucsd.edu/ma<wbr>ilman/listinfo/3dem</a><br>
<br></blockquote></div><span class="HOEnZb"><font color="#888888"><br><br clear="all"><div><br></div>-- <br><div class="m_-8704378365130005945gmail_signature" data-smartmail="gmail_signature"><br>Stefan Bohn<br>Gladstone Institute<br>1650 Owens Street<br>San Francisco, CA. 94158<br>Phone: <a href="tel:(415)%20476-2980" value="+14154762980" target="_blank">+1 (415) 476 - 2980</a><br>Fax: <a href="tel:(415)%20514-9736" value="+14155149736" target="_blank">+1 (415) 514 - 9736</a><br><a href="mailto:stefan.bohn@gladstone.ucsf.edu" target="_blank">stefan.bohn@gladstone.ucsf.edu</a></div>
</font></span></div></div>
<br>______________________________<wbr>_________________<br>
3dem mailing list<br>
<a href="mailto:3dem@ncmir.ucsd.edu">3dem@ncmir.ucsd.edu</a><br>
<a href="https://mail.ncmir.ucsd.edu/mailman/listinfo/3dem" rel="noreferrer" target="_blank">https://mail.ncmir.ucsd.edu/<wbr>mailman/listinfo/3dem</a><br>
<br></blockquote></div><br></div>