<html>
<head>
<meta http-equiv="Content-Type" content="text/html; charset=us-ascii">
</head>
<body style="word-wrap: break-word; -webkit-nbsp-mode: space; -webkit-line-break: after-white-space; color: rgb(0, 0, 0); font-size: 14px; font-family: Calibri, sans-serif;">
<div>Hi Henning,</div>
<div><br>
</div>
<div>There is one more thing you may check, the comma free alignment is important to the high resolution, beam tilted too much would distort images.</div>
<div><br>
</div>
<div>Dan</div>
<div><br>
</div>
<div>Dan Shi</div>
<div>Janelia Research Campus, HHMI</div>
<div>19700 Helix Dr, Ashbirn</div>
<div>VA 20147, USA </div>
<div><br>
</div>
<span id="OLK_SRC_BODY_SECTION">
<div style="font-family:Calibri; font-size:11pt; text-align:left; color:black; BORDER-BOTTOM: medium none; BORDER-LEFT: medium none; PADDING-BOTTOM: 0in; PADDING-LEFT: 0in; PADDING-RIGHT: 0in; BORDER-TOP: #b5c4df 1pt solid; BORDER-RIGHT: medium none; PADDING-TOP: 3pt">
<span style="font-weight:bold">From: </span>3dem <<a href="mailto:3dem-bounces@ncmir.ucsd.edu">3dem-bounces@ncmir.ucsd.edu</a>> on behalf of Henning Stahlberg <<a href="mailto:henning.stahlberg@unibas.ch">henning.stahlberg@unibas.ch</a>><br>
<span style="font-weight:bold">Date: </span>Thursday, May 11, 2017 at 9:08 AM<br>
<span style="font-weight:bold">To: </span>3dem <<a href="mailto:3dem@ncmir.ucsd.edu">3dem@ncmir.ucsd.edu</a>><br>
<span style="font-weight:bold">Subject: </span>[3dem] Request for help to find source of resolution loss in cryo-EM<br>
</div>
<div><br>
</div>
<div>
<div style="word-wrap: break-word; -webkit-nbsp-mode: space; -webkit-line-break: after-white-space;">
Hi,<br class="">
<br class="">
We have a strange problem on one of our instruments (Titan Krios with Quantum-LS GIF and K2 Summit in counting mode).<br class="">
When recording images at low mag (1.04 A/px for the 4k images) and low-dose conditions of a partly devitrified sample, and compute the FFTs, we can see the 3.7A ice ring and also the second-order 2.1A ice ring, sometimes a third-order ring in the corners at
 1.7A resolution.<br class="">
We recently observed a resolution loss visible in the FFTs only in the vertical direction, shown by an amplitude decay in the upper and lower quarter of the FFTs. <br class="">
However, while the 3.7A ring shows that anisotropic resolution loss, the 2.1A ring is still isotropically present.  An example image is attached.<br class="">
<br class="">
Does anybody have an idea what could cause such a behavior?<br class="">
<br class="">
Thanks,<br class="">
<br class="">
Henning.<br class="">
<br class="">
<br class="">
<br class="">
<div class="">Henning Stahlberg, PhD<br class="">
Prof. for Structural Biology, C-CINA, Biozentrum, University Basel<br class="">
Mattenstrasse 26 | D-BSSE | WRO-1058 | CH-4058 Basel | Switzerland<br class="">
<a href="http://c-cina.org" class="">http://c-cina.org</a> | Tel. +41-61-387 32 62<br class="">
<br class="">
<br class="">
</div>
<img apple-inline="yes" id="066316CC-995C-4F56-A073-8679AD175598" src="cid:B7A95807-B089-4AE2-83FE-006601983C3B" class=""></div>
</div>
</span>
</body>
</html>