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<div>
<div>
<div>I would echo having very dry nitrogen when you load samples. We built a simple way of drying dewars overnight. We hung them upside down and shoved a hose that went to the house air in there. Turn on the house air and voila! Dry dewars. We put an industrial
 air filter in the system to make sure we weren't blowing any contaminants into the dewars. They were nice and dry every morning.</div>
<div><br>
</div>
<div>Good luck!</div>
<div><br>
</div>
<div>
<div>-- </div>
<div>
<div style="font-family: 'Iowan Old Style', sans-serif; font-size: 16px;"><span style="font-size: 12pt; font-family: 'Lucida Handwriting';">Cindi L. Schwartz</span>    </div>
<div style="font-family: 'Iowan Old Style', sans-serif; font-size: 16px;">Electron Microscopist</div>
<div style="font-family: 'Iowan Old Style', sans-serif; font-size: 16px;">Rocky Mountain Labs/NIAID/NIH</div>
<div style="font-family: 'Iowan Old Style', sans-serif; font-size: 16px;">903 South 4th Street</div>
<div style="font-family: 'Iowan Old Style', sans-serif; font-size: 16px;">Hamilton, MT  59840</div>
<div style="font-family: 'Iowan Old Style', sans-serif; font-size: 16px;">240-669-5473</div>
<div style="font-family: 'Iowan Old Style', sans-serif; font-size: 16px;"><a href="mailto:Cindi.Schwartz@NIH.gov">Cindi.Schwartz@NIH.gov</a></div>
<div style="font-family: 'Iowan Old Style', sans-serif; font-size: 16px;">
<p class="MsoNormal"><span style="font-family: 'Iowan Old Style Roman'; color: rgb(155, 187, 89);"><img width="19" height="19" src="cid:97655F64-FDD8-4ED3-B94F-F86E18D05068" alt="Description: Macintosh HD:Users:schwartzcl:Desktop:large-green-recycle-symbol-hi.png" v:shapes="Picture_x0020_1" type="image/png"></span><span style="font-family: 'Iowan Old Style Roman'; color: rgb(155, 187, 89);"> 
 Please remember our Earth before printing this email <img width="19" height="19" src="cid:E0A4FF89-0382-4D84-B02B-98866414C850" alt="Description: Macintosh HD:Users:schwartzcl:Desktop:large-green-recycle-symbol-hi.png" v:shapes="Picture_x0020_2" type="image/png"><o:p></o:p></span></p>
</div>
<div style="font-family: 'Iowan Old Style', sans-serif; font-size: 16px;"><span style="font-family: 'Iowan Old Style Roman'; font-size: 13pt;">*************************************************************************</span></div>
<div style="font-family: 'Iowan Old Style', sans-serif; font-size: 16px;">
<p class="MsoNormal"><span style="font-family: 'Iowan Old Style Roman';">The information in this e-mail and any of its attachments is confidential and may contain sensitive information. It should not be used by anyone who is not the original intended recipient.
 If you have received this e-mail in error please inform the sender and delete it from your mailbox or any other storage devices. National Institute of Allergy and Infectious Diseases shall not accept liability for any statements made that are sender's own
 and not expressly made on behalf of the NIAID by one of its representatives. </span><span style="font-family: 'Iowan Old Style Roman';"><o:p></o:p></span></p>
<p class="MsoNormal"><span style="font-size: 13pt; font-family: 'Iowan Old Style Roman';">*************************************************************************</span></p>
</div>
</div>
</div>
</div>
</div>
<div><br>
</div>
<span id="OLK_SRC_BODY_SECTION">
<div style="font-family:Calibri; font-size:11pt; text-align:left; color:black; BORDER-BOTTOM: medium none; BORDER-LEFT: medium none; PADDING-BOTTOM: 0in; PADDING-LEFT: 0in; PADDING-RIGHT: 0in; BORDER-TOP: #b5c4df 1pt solid; BORDER-RIGHT: medium none; PADDING-TOP: 3pt">
<span style="font-weight:bold">From: </span>Nadav Elad <<a href="mailto:nadav.elad@weizmann.ac.il">nadav.elad@weizmann.ac.il</a>><br>
<span style="font-weight:bold">Date: </span>Thursday, September 1, 2016 at 3:00 AM<br>
<span style="font-weight:bold">To: </span>"<a href="mailto:3dem@ncmir.ucsd.edu">3dem@ncmir.ucsd.edu</a>" <<a href="mailto:3dem@ncmir.ucsd.edu">3dem@ncmir.ucsd.edu</a>><br>
<span style="font-weight:bold">Subject: </span>[3dem] contamination in cryo samples<br>
</div>
<div><br>
</div>
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<p class="MsoNormal">Dear all<o:p></o:p></p>
<p class="MsoNormal"><o:p> </o:p></p>
<p class="MsoNormal">We are having a serious contamination problem in our cryo preparations and would be grateful for any suggestion. Although this issue has been discussed in the past in this forum, the solutions raised do not seem to work. The attached image
 shows the contamination on a bad day. I am referring mainly to the lighter, smaller particles (10-20 nm) which are the most persistent. They seem to be above or below the ice layer and are the first to evaporate under the electron beam. The concentration of
 contaminants is variable. <o:p></o:p></p>
<p class="MsoNormal"><o:p> </o:p></p>
<p class="MsoNormal">We are using a Leica EM GP plunger for freezing, and Tecnai T12 and F20 microscopes with Gatan side entry holders. We have tried to replace the ethane cylinder and are in the process of ordering a third one, cleaning the glow discharger
 machines, different cryo holders, different cryo-transferring units and grids of varying sources. There seems to be no leaks in the compustages of the microscopes.<o:p></o:p></p>
<p class="MsoNormal"><o:p> </o:p></p>
<p class="MsoNormal">Thank you for your help<o:p></o:p></p>
<p class="MsoNormal"><o:p> </o:p></p>
<p class="MsoNormal">Nadav<o:p></o:p></p>
<p class="MsoNormal"><o:p> </o:p></p>
<p class="MsoNormal">--<o:p></o:p></p>
<p class="MsoNormal">Nadav Elad, Ph.D<span dir="RTL"></span><span dir="RTL"></span><span lang="HE" dir="RTL" style="font-family: Arial, sans-serif;"><span dir="RTL"></span><span dir="RTL"></span>.<br>
</span>Electron Microscopy Unit<span lang="HE" dir="RTL" style="font-family: Arial, sans-serif;"><br>
</span>Weizmann Institute of Science<o:p></o:p></p>
<p class="MsoNormal">Rehovot, Israel<span lang="HE" dir="RTL" style="font-family: Arial, sans-serif;"><br>
</span>Tel: +972 (0) 8 934 2115<o:p></o:p></p>
<p class="MsoNormal">Mobile:  +972 (0) 52 3909 420<o:p></o:p></p>
<p class="MsoNormal">Email:  <a href="mailto:nadav.elad@weizmann.ac.il">nadav.elad@weizmann.ac.il</a><o:p></o:p></p>
<p class="MsoNormal"><o:p> </o:p></p>
</div>
</div>
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