<div dir="ltr"><div class="gmail_default" style="font-family:arial,helvetica,sans-serif;font-size:small">Dear Prakash,</div><div class="gmail_default" style="font-family:arial,helvetica,sans-serif;font-size:small"><br></div><div class="gmail_default" style="font-family:arial,helvetica,sans-serif;font-size:small">150kDa shouldn't prevent you from trying at least.</div><div class="gmail_default" style="font-family:arial,helvetica,sans-serif;font-size:small">Of course you need access to a TEM equipped with a K2 and possibly volta phase plate.</div><div class="gmail_default" style="font-family:arial,helvetica,sans-serif;font-size:small">Before you invest time in the cryo prep, I would advise having a look in negative stain first, maybe make sure you can get some nice 2d averages or even a low resolution 3D.</div><div class="gmail_default" style="font-family:arial,helvetica,sans-serif;font-size:small">If you don't have a K2/vpp, then collaborate with some lab that has those.</div><div class="gmail_default" style="font-family:arial,helvetica,sans-serif;font-size:small">There's also the option to access multi-users cryo-EM facilities. Bob Glaeser listed a few in commentary of Nat Meth of the year <a href="http://www.nature.com/nmeth/journal/v13/n1/fig_tab/nmeth.3695_T1.html">http://www.nature.com/nmeth/journal/v13/n1/fig_tab/nmeth.3695_T1.html</a></div><div class="gmail_default" style="font-family:arial,helvetica,sans-serif;font-size:small"><br></div><div class="gmail_default" style="font-family:arial,helvetica,sans-serif;font-size:small">150 is not easy but it's not impossible, of course it's highly sample dependent.</div><div class="gmail_default" style="font-family:arial,helvetica,sans-serif;font-size:small"><br></div><div class="gmail_default" style="font-family:arial,helvetica,sans-serif;font-size:small">Best,</div><div class="gmail_default" style="font-family:arial,helvetica,sans-serif;font-size:small">Ludo</div></div><div class="gmail_extra"><br><div class="gmail_quote">On Sat, Apr 23, 2016 at 9:34 PM, prakash shukla <span dir="ltr"><<a href="mailto:life.prakash@gmail.com" target="_blank">life.prakash@gmail.com</a>></span> wrote:<br><blockquote class="gmail_quote" style="margin:0 0 0 .8ex;border-left:1px #ccc solid;padding-left:1ex"><div dir="ltr">Dear All,<div><br></div><div>I have purify a complex of three proteins.They are interacting with each other but the molecular weight of protein 150 kDa. I want to do cryoEM for complex as for literature molecular weight of protein should be more than 300 kDa. how should i proceed for Cryo EM. Suggestions are most welcome.</div><div><br></div><div>Regards</div><span class="HOEnZb"><font color="#888888"><div><br></div><div>Prakash</div><div><br></div><div>   </div></font></span></div>
<br>_______________________________________________<br>
3dem mailing list<br>
<a href="mailto:3dem@ncmir.ucsd.edu">3dem@ncmir.ucsd.edu</a><br>
<a href="https://mail.ncmir.ucsd.edu/mailman/listinfo/3dem" rel="noreferrer" target="_blank">https://mail.ncmir.ucsd.edu/mailman/listinfo/3dem</a><br>
<br></blockquote></div><br></div>