<div dir="ltr"><div><div><div><div><div><div><div><div><div>Dear 3DEM.<br><br>Perhaps the community can assist with this issue we are struggling with.  In Low Dose on our Tecnai F30, the Low Dose focus image has a different defocus value (using FFT) versus Low Dose Exposure. <br><br>I have been checking this on a relatively flat cross-grating (not cryo) specimen.  I set LD exposure to be zero defocus (with focus knob), but when I switch over to LD focus (~ 3 micron away on tilt axis) the image is defocused (~ -2 micron).  <br><br>I believe there is some 200 kV procedure alignment that must not be set properly - but am not quite sure which one...any suggestions on what to tweak to get this exposure/focus area reflecting the same defocus?<br><br></div>Thanks for any suggestions...<br></div>Tommi<br><br></div>Tommi A. White, Ph.D.<br></div>Associate Director, Electron Microscopy Core Facility<br></div>Assistant Professor of Biochemistry<br></div>University of Missouri<br></div>W125 Veterinary Medicine<br></div>Columbia, MO 65211<br></div>573-882-8304<br><a href="http://emc.missouri.edu">http://emc.missouri.edu</a><br><br></div>